利用酪酷胺信号放大(Tyramide signal amplification)技术使目标蛋白标记上荧光。一抗洗脱后，进行下一个目标蛋白的荧光染色，再洗脱，再下一个目标蛋白的荧光染色...循环反复可实现同一张样本多个蛋白的不同荧光标记。